去除重鏈輕鏈干擾：只要一招快速解決你的煩惱

時間：2016-12-02作者：武漢艾美捷科技有限公司瀏覽：118

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  在*沉淀(Immunoprecipitation, IP)和*共沉淀(co-Immunoprecipitation, co-IP) 實驗中，IP和WB的操作過程中通常會用到相同的一抗或同種屬來源的一抗，這種情況下，如果使用常規的Anti-IgG（H+L）酶標二抗，WB實驗中IP抗體變性后產生的重鏈（55kDa）和輕鏈（25kDa）都能夠識別，而此非特異的信號往往會部分甚至完全掩蓋目的蛋白的信

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  His標簽是由6個組氨酸(His-His-His-His-His-His)組成的短肽,專門設計用于重組蛋白質的吸附純化。由于分子量較小，并且較*分離和純化，His-tag 融合標簽與其他標簽相比有很多明顯優勢, 是目前用于純化的融合標簽中使用較為廣泛的一種。His抗體可以用于檢測和His標簽融合表達蛋白的表達、細胞內定位，以及純化、定性或定量檢測His融合表達蛋白等。然而，目前商品化His 蛋白

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• 去除重鏈輕鏈干擾：只要一招快速解決你的煩惱

  在*沉淀試驗后的WB驗證環節中，二抗的選擇往往可以避免經常出現的重鏈輕鏈的干擾原因，當使用常規的Anti-lgG(H+L)酶標二抗時，通常會出現對應*沉淀一看的重鏈（55kDa）和輕鏈（30kDa）的兩條帶。如果檢測的目的蛋白分子量在55kDa或者30kDa附近時，就會收到這兩條帶的干擾。針對這種情況，艾美捷推薦兩種二抗解決方案： 一種是在IP和WB實驗中使用相同的抗體，可以通過蛋白質分子量