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許多生物學實驗都需要使用緩沖液來維持有效的pH,這很重要,因為蛋白質(zhì)和酶對pH的變化敏感,因此為當前和下游實驗選擇正確的緩沖液至關重要。在本文中,我將簡要討論HEPES和PIPES在配置及使用過程中要考慮的一些重要因素,希望能對大家有所幫助。 如何制作HEPES及使用注意事項 HEPES是兩性離子Good's緩沖液,在6.8至8.2的pH范圍內(nèi)有效。這使HEPES在生理pH值下成為有效的緩沖液。該
在醫(yī)院的一些臨床檢驗中,使用全血或血漿檢查,通常采集靜脈血做檢查標本,根據(jù)不同的檢查需求,也會添加不同的抗凝劑。在體外診斷的特定領域中,通常將抗凝劑添加到采血管中防止血液凝固形成血凝塊,以保持血液的流動性方便進行血液檢測。乙二胺四乙酸 (EDTA) 是一種多元酸,含有四個羧酸基團和兩個胺基團,帶有孤對電子,可螯合鈣和其他幾種金屬離子。鈣是凝血級聯(lián)的各種酶反應的必需物質(zhì),EDTA與鈣離子結合形成螯合
過yang化物酶可催化過yang化氫的氧化反應,在Trinder反應、酶聯(lián)免疫、魯米諾發(fā)光反應中催化顯色底物、發(fā)光底物與過yang化氫的反應。過yang化物酶還有一些替代物,也能具有催化活性。 過yang化物酶替代物 過yang化物酶是一類能催化過yang化氫氧化分類或胺類(如苯分、Trinder’s試劑、魯米諾)的酶,含有亞鐵原卟啉輔基,過yang化物酶、過yang化氫酶,另外過yang化物模擬
PIPES中文名是哌嗪 N,N'二(2乙磺酸),它與HEPES緩沖液屬于同一家族,也是哌嗪緩沖液家族的一員,為兩性離子緩沖液,PIPES的有效PH值范圍為6.1至7.5內(nèi),不會與金屬絡合,所以常用于含金屬離子的溶液,也可使用于磷酸纖維素色譜純化微管蛋白,用于凝膠過濾法純化重組GTP結合蛋白ARF1和ARF2,作為緩沖液從大腸桿菌中結晶轉酮酶以及代替草甘膦緩沖液。另外,由于PIPES能形成自由基,因
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